Blood carbonyl protein measurement as a specific oxidative stress biomarker after intestinal reperfusion in rats / Dosagem da proteína carbonilada sanguínea como biomarcador específico do estresse oxidativo após reperfusão intestinal em ratos

PURPOSE: An experimental study was performed to investigate the use of protein carbonyl group as a specific biological marker for oxidative stress in a rat model of intestinal ischaemia-reperfusion. METHODS: Twenty four male Wistar rats were randomly distributed into three groups with eight animals each: Group 1 - Control group; Group 2 - Sham; Group 3 - Intestinal ischaemia by clamping ileal branches of the superior mesenteric artery for one hour, followed by another hour of reperfusion. Blood samples were taken in order to analyze the protein carbonyl level by Slot blotting assay. RESULTS: In group 3 a significant increase of protein carbonyl level was observed if compared to the homogenous levels of groups 1 and 2. CONCLUSION: From the results it may be concluded that the protein carbonylation may be used as a specific marker for measuring oxidative stress in rat intestinal reperfusion model.

OBJETIVO: Realizou-se um estudo experimental com a finalidade de investigar o uso da proteína carbonilada como um marcador biológico específico do estresse oxidativo em um modelo de isquemia e reperfusão intestinal, em ratos. MÉTODOS: Vinte e quarto ratos da linhagem Wistar, machos foram distribuídos, aleatoriamente, em três grupos compostos por oito animais cada: Grupo 1 - Controle; Grupo 2 - Simulação e Grupo 3 - Submetido à isquemia, mediante clampeamento de ramos ileais da artéria mesentérica superior por uma hora, seguida de reperfusão, por igual período. Amostras sanguíneas obtidas foram utilizadas para analise dos níveis de proteína carbonilada, através do método Slot blotting. RESULTADOS: No grupo 3 houve uma elevação significante da concentração de proteína carbonilada sérica se comparada aos níveis sanguíneos homogêneos encontrados nos grupos 1 e 2. CONCLUSÃO: Fundamentado nos resultados é possível concluir que, a carbonilação protéica pode ser utilizada como um marcador específico para a mensuração do estresse oxidativo em modelos de reperfusão intestinal, em ratos.

Enterocyte ultrastructural alterations following intestinal obstruction in rats / Alterações ultra-estruturais do enterócito após obstrução intestinal em ratos

PURPOSE: To analyze the small intestinal mucosa ultrastructure, and to characterize the enterocyte lesion severity caused by mechanical intestinal obstruction combined or not with an ischemia of the mesenteric marginal vessels arch. METHODS: It was used 47 Wistar rats divided into 4 groups as follows: Group 1- Control rats (C), Group 2- sham rats (S), Group 3- rats submitted to intestinal obstruction excluding marginal vessel (OEV), Group 4- Intestinal obstruction including marginal vessels (OIV). Rats of groups 3 and 4 were allotted into two subgroups for the removal of small intestinal tissue samples, one at the proximal (P), and the other at the distal (D) segments from the obstruction site. Samples of groups 2, 3, 4 were obtained 24, 48, and 72 hours after post operation care. Small intestinal tissue samples of group 1 were excised following laparotomy. Imaging in Light and Transmission Electronic Microscopy were used for morphological and morphometric studies. The results were analyzed by using the ANOVA and Newman-Keuls tests. RESULTS: No irreversible lesion was observed. In the 24 hours microvilli volume of group 3 turned down at the proximal site henceforth enlarging very slowly within the next 72 hours. At the distal site significant microvilli shrinkage was observed up to 48 hours. Then they recovered their volume after 72 hours. In the 24 hours microvilli volume of group 4 grew twice in comparison with the microvilli of group 1 rats but after 72 hours there was drastic volume shrinkage, shape alterations, and severe flatness, especially in the distal segments of the obstruction site. CONCLUSIONS: Terminal ileum mechanical obstruction with mesenteric marginal arch ischemia led to reversible ultrastructural alterations after 72 hours, and the injury is proportional to the persistence of the obstructive process. Furthermore the mesenteric vessels of the marginal arcade play an important role in the maintenance of mucosal integrity, ...

OBJETIVO: Analisar as alterações ultra-estruturais da mucosa do intestino delgado e caracterizar a severidade das lesões causadas por uma obstrução intestinal mecânica, associada ou não a isquemia da arcada marginal mesentérica. MÉTODOS: Foram utilizados 47 ratos, da linhagem Wistar, distribuídos em quatro grupos, da seguinte forma: Grupo 1 - Controle (C), Grupo 2- Simulação (S), Grupo 3- Ratos com obstrução intestinal sem inclusão de vaso marginal (OEV), Grupo 4 - Obstrução intestinal com inclusão de vaso marginal (OIV). Os animais dos grupos 3 e 4 foram redistribuídos em dois subgrupos com coleta de amostras do intestino delgado, à montante (P) e à jusante (D) do ponto de obstrução. Nos grupos 2, 3 e 4, as amostras foram colhidas com 24, 48 e 72 horas de pós-operatório. No grupo 1, este material foi retirado após laparotomia. Realizaram-se estudos morfológicos e morfométricos dos microvilos através das Microscopias Óptica e Eletrônica de Transmissão. Os resultados foram analisados mediante os testes estatísticos de ANOVA e Newman-Keuls. RESULTADOS: Não foram observadas lesões irreversíveis. No grupo 3 com 24 horas, o volume dos microvilos diminuiu, à montante, com discreto aumento em 72 horas. Á jusante, houve redução significante até 48 horas, com recuperação em 72 horas. No grupo 4, o volume dos microvilos quase dobrou em relação ao grupo 1, com 24 horas, mas reduziu-se, drasticamente, em especial à jusante, com 72 h de evolução, apresentando deformidade e achatamento severos, achados estes estatisticamente significantes. CONCLUSÕES: A obstrução intestinal mecânica do íleo terminal, associada ou não a isquemia da arcada mesentérica marginal, causa alterações ultra-estruturais reversíveis dos enterócitos, cuja gravidade é diretamente proporcional à duração do processo mórbido obstrutivo, até 72 horas de evolução. Aduz-se que, os vasos mesentéricos da arcada marginal exercem um papel relevante na preservação da mucosa intestinal, na ...

Modelo experimental em ratos para o desenvolvimento de pseudoartrose / Experimental model in rats for the development of pseudoarthrosis

OBJETIVO: Descreve-se a técnica de um novo um modelo de pseudoartrose em Rattus norvegicus albinus livre de espécies patogênicas (SPF). MÉTODOS: Os animais foram aleatoriamente distribuídos em dois Grupos: Grupo 1 - Controle (n =6), Grupo 2 - Experimental (n =6). No grupo Controle realizou-se um acesso ao fêmur, seguido da síntese por planos do músculo e da pele. O grupo Experimental foi submetido à osteotomia do fêmur aduzida da confecção de um retalho pediculado de fáscia lata para interposição entre os segmentos resultantes da fratura induzida cirurgicamente. Prosseguiu-se com o alinhamento e aproximação dos segmentos ósseos, mediante uso de fios de náilon introduzidos em orifícios efetuados na extremidade proximal e distal. RESULTADOS: Estudos radiológico e anatomopatológico evidenciaram a ausência de consolidação óssea com persistência de tecido fibro-osteóide decorridos 120 dias de evolução pós-operatória. CONCLUSÃO: O modelo experimental é adequado para a formação de pseudoartrose em ratos.

OBJECTIVE: We sought to describe a new model of pseudoarthrosis in rats free of pathogenic species (Rattus norvegicus albinus - SPF). METHODS: The animals were randomly distributed into two groups were used: Group 1 - Control (n =6); Group 2 - Experimental (n =6). In the Control group an access to the femur followed by the synthesis of the muscular and skin layers was done. The Experimental group was submitted to osteotomy of the femur and a pedicle flap of the fascia lata was interposed between the segments resulting from the surgically induced fracture. The procedure was carried on with both alignment and approximation of the fractured bone through the use of mononylon thread introduced into holes created in the proximal and distal. RESULTS: Radiological and anatomopathological studies showed the absence of bone consolidation with persistence of fibro-osteoid tissue up to 120 days of follow-up. CONCLUSION: The experimental model is suitable for the development of a pseudoarthrosis in rats.

Modelo cirúrgico de insuficiência renal crônica: estudo em coelhos / Surgical model of chronic renal failure: study in rabbits

OBJETIVO: Estabelecer um modelo de insuficiência renal crônica (IRC) em coelhos, com perspectivas de seu uso para ações terapêuticas e reparadoras. MÉTODO: Foram utilizados 19 coelhos da linhagem Nova Zelândia, machos, adultos, aleatoriamente distribuídos em três Grupos: Grupo 1 - Controle (n =5), Grupo 2- Simulação (n =7), Grupo 3 - Experimental (n =7). Os animais foram anestesiados com Cetamina e Diazepam e Fentanil por via intramuscular e Sevorane, através de vaporizador. No Grupo 3 realizou-se uma nefrectomia bipolar esquerda e após quatro semanas, uma nefrectomia direita. Todas as amostras do parênquima renal foram pesadas. O Grupo 2 foi submetido a duas laparotomias, sem nefrectomia.. Em todos os grupos foram realizadas avaliações: bioquímicas com dosagens de uréia, creatinina, sódio e potássio; ultra-sonográficas abdominais; cintigráficas e histológicas. RESULTADOS: No Grupo 3 houve aumento progressivo da uréia (p=0.0001), creatinina (p=0,0001), sódio (p= 0,0002) e potássio (p=0,0003). A comparação destes resultados com os dos Grupos 1 e 2, nos diversos intervalos, também revelou elevação sérica, com significância estatística (p < 0,05). A ultra-sonografia identificou aumento do rim esquerdo no grupo 3, após 16 semanas. A cintigrafia comprovou, na 4ª semana, perda de 75 por centoda massa renal esquerda. No Grupo 3, a avaliação histológica evidenciou fibrose subcapsular e intersticial e regeneração tubular. CONCLUSÃO: O modelo experimental de IRC é exeqüível, com sobrevida dos animais, em médio prazo, o que permite o uso deste intervalo como janela terapêutica para testar diferentes ações reparadoras ao parênquima renal comprometido.

OBJECTIVES: To establish a model of chronic renal failure in rabbits, with perspectives of its use for therapeutic and repairing actions. METHODS: Nineteen males, adults rabbits (New Zealand) randomly distributed into three groups were used: Group 1 - Control (n =5); Group 2-Sham (n =7); and Group 3 - Experimental (n =7). They were anaesthetized by using intramuscular Cetamine, Diazepam and Fentanyl followed by Sevorane with vaporizer device. In Group 3, a bipolar left nephrectomy was carried out and after four weeks, it was also done a right nephrectomy. All the samples of the renal tissue were weighed. The Group 2 was only submitted to both abdominal laparotomies, without nephrectomy. Biochemical evaluations, with urea, creatinina, sodium and potassium measurement; abdominal ultrasound scan; scintigraphy and histological analysis were performed in all animals. RESULTS: In group 3 there was a progressive increase of urea (p=0.0001), creatinine (p=0.0001), sodium (p = 0,0002) and potassium (p=0,0003). The comparison of these results with those one of the Groups 1 and 2, in all intervals, revealed blood rising with statistical significant level (p < 0,05). In Group 3, the ultrasound scan identified an increasing of the left kidney size, after 16 weeks and at the 4th week the scintigraphy confirmed the loss of 75 percent of the left renal mass. In the same group, the histological evaluation showed subcapsular and intersticial fibrosis and also tubular regeneration. CONCLUSION: The experimental model of IRC is feasible, with animal's survival in middle term which allows the use of this interval like a therapeutic window for testing different approaches in order to repair the kidney damages.